Биоинженерные технологии отслеживают живые клетки
Клетки в сложных организмах претерпевают частые изменения, и исследователи изо всех сил пытались отслеживать эти изменения и создать всесторонний профиль живых клеток и тканей. Исторически исследователи были ограничены только 3-5 маркерами из-за спектрального перекрытия в флуоресцентной микроскопии, важном инструменте, необходимом для визуализации клеток. Только с этой небольшой горсткой маркеров трудно контролировать экспрессию белка в живых клетках, и невозможно создать полный профиль клеточной динамики. Новое исследование в Nature Biotechnology устраняет эти ограничения, демонстрируя новый метод комплексного профилирования живых клеток.
Джина Ко, доцент биоинженерии в Школе инженерии и прикладных наук и патологии и лабораторной медицины в Медицинской школе Перельмана, была ведущим автором этого нового исследования. Ко проводил постдокторские исследования в Массачусетской больнице общего профиля (MGH) и Институте Висса Гарвардского университета, а работа над этим исследованием проводилась в сотрудничестве с доктором медицинских наук Джонатаном Карлсоном. и Ральф Вайсследер, доктор медицины, доктор философии. МГХ. Лаборатория Ко в Пенсильвании разрабатывает новые технологии с использованием биоинженерии, молекулярной биологии и химии для решения диагностических задач точной медицины.
Чтобы устранить эти ограничения в микроскопии, команда Ко разработала новый химический инструмент, который был очень щадящим для клеток. В этом методе «ускоренного расщеплением флуорофора (или SAFE)» используется химия «щелчка», тип химии, который следует примерам, встречающимся в природе, для создания быстрых и простых реакций. Этот новый метод SAFE позволил Ko достичь нетоксичных условий для живых клеток и тканей, тогда как в предыдущих методах использовались агрессивные химические вещества, которые удаляли флуорофоры и, следовательно, не работали с живыми клетками и тканями.
С разработкой SAFE авторы продемонстрировали, что теперь исследователи могут эффективно выполнять несколько циклов профилирования клеток и отслеживать клеточные изменения в ходе своих наблюдений. Вместо прежнего ограничения в 3-5 маркеров SAFE допускает намного больше циклов и может отслеживать почти столько маркеров, сколько хочет исследователь. Теперь можно окрашивать клетки и подавлять/высвобождать флуорофоры, а также многократно повторять цикл для мультиплексирования живых клеток. Каждый цикл может профилировать 3 маркера, поэтому любой, кто заинтересован в профилировании 15 маркеров, может легко выполнить 5 циклов, чтобы получить гораздо более полный профиль клеток. Благодаря этому прорыву в более детальной визуализации клеток SAFE демонстрирует широкую применимость, позволяющую исследователям лучше исследовать физиологическую динамику в живых системах. «Пространственно-временная мультиплексная иммунофлуоресцентная визуализация живых клеток и тканей с биоортогональным циклом флуоресцентных зондов» опубликована в Nature Biotechnology.
Источник
Источник: ufonews.su
